У біялагічных даследаваннях звычайна выкарыстоўваюцца поліпептыды з доўгай паслядоўнасцю.Для пептыдаў з больш чым 60 амінакіслотамі ў паслядоўнасці для іх атрымання звычайна выкарыстоўваюцца генная экспрэсія і SDS-PAGE.Аднак гэты метад займае шмат часу, і канчатковы эфект аддзялення прадукту не добры.
Праблемы і рашэнні для працяглага сінтэзу пептыдаў
Пры сінтэзе доўгіх пептыдаў мы заўсёды сутыкаемся з праблемай, гэта значыць, што стэрычная перашкода рэакцыі кандэнсацыі павялічваецца з павелічэннем паслядоўнасці ў сінтэзе, і час рэакцыі неабходна адрэгуляваць, каб зрабіць рэакцыю поўнай.Аднак чым даўжэй час рэакцыі, тым больш узнікаюць пабочных эфектаў і ўтвараецца частка мэтавага пептыда.Такія рэшткі - дэфіцытныя пептыдныя ланцугі з'яўляюцца ключавымі прымешкамі, якія ўтвараюцца ў доўгім сінтэзе пептыдаў.Такім чынам, у сінтэзе доўгага пептыда ключавая праблема, якую мы павінны пераадолець, - гэта вывучыць якасныя ўмовы і метады рэакцыі, каб зрабіць рэакцыю кандэнсацыі амінакіслот больш поўнай і поўнай.Акрамя таго, скароціце час рэакцыі, таму што чым даўжэй час рэакцыі, тым больш некантралюемых пабочных рэакцый, тым больш складаныя пабочныя прадукты.Такім чынам, абагульняюцца наступныя тры моманты:
Мікрахвалевы сінтэз можна выкарыстоўваць: Для некаторых амінакіслот, якія сустракаюцца ў працэсе сінтэзу і якія няпроста інтэграваць, можна выкарыстоўваць мікрахвалевы сінтэз.Гэты метад дае выдатныя вынікі і значна скарачае час рэакцыі, а таксама памяншае адукацыю двух ключавых пабочных прадуктаў.
Можа быць выкарыстаны метад сінтэзу фрагментаў: Калі некаторыя пептыды цяжка сінтэзаваць з дапамогай звычайных метадаў сінтэзу і няпроста ачысціць, мы можам прыняць поўную кандэнсацыю некалькіх амінакіслот у пэўным сегменце пептыда да пептыднага ланцуга ў цэлым.Гэты метад таксама можа вырашыць многія праблемы ў сінтэзе.
Можа быць выкарыстаны сінтэз ацилгидразида: ацилгидразидный сінтэз пептыдаў з'яўляецца метадам цвёрдафазнага сінтэзу N-канцавога пептыда Cys і С-канцавога поліпептыд гидразида хімічнай селектыўнай рэакцыі паміж адукацыяй амидных сувязяў для дасягнення метаду пептыднай сувязі.Грунтуючыся на становішчы Cys у пептыднай ланцугу, гэты метад дзеліць увесь пептыдны ланцуг на некалькі паслядоўнасцей і сінтэзуе іх адпаведна.Нарэшце, мэтавы пептыд атрымліваецца з дапамогай рэакцыі кандэнсацыі ў вадкай фазе.Гэты метад не толькі значна скарачае час сінтэзу доўгага пептыда, але і значна павышае чысціню канчатковага прадукту.
Працяглая ачыстка пептыдаў
Спецыфіка доўгіх пептыдаў непазбежна прыводзіць да складаных кампанентаў сырых пептыдаў.Такім чынам, ачысціць доўгія пептыды з дапамогай ВЭЖХ таксама складана.амилоид серыі працэсу ачысткі поліпептыд, паглынаючы вялікі вопыт і паспяхова выкарыстоўваецца ў ачыстцы доўгага пептыда.Дзякуючы прыняццю новага абсталявання, змешванню некалькіх сістэм ачысткі, шматразоваму раздзяленню і іншым вопытным метадам паспяховасць доўгай ачысткі пептыдаў была значна палепшана.
Час публікацыі: 18 красавіка 2023 г