В биологических исследованиях обычно используются полипептиды с длинной последовательности. Для пептидов с более чем 60 аминокислотами в последовательности экспрессия генов и SDS-PAGE обычно используются для их получения. Тем не менее, этот метод занимает много времени, и конечный эффект разделения продукта не очень хорош.
Проблемы и решения для синтеза длинного пептида
В синтезе длинных пептидов мы всегда сталкиваемся с проблемой, то есть стерическое препятствие реакции конденсации увеличивается с увеличением последовательности в синтезе, и время реакции необходимо скорректировать, чтобы завершить реакцию. Однако чем дольше время реакции, тем больше побочных эффектов вырабатывается, и образуется часть целевого пептида. Такие остатки - дефицитные пептидные цепи представляют собой ключевые примеси, продуцируемые в синтезе длинного пептида. Следовательно, в синтезе длинного пептида ключевая проблема, которую мы должны преодолеть, заключается в изучении высококачественных условий реакции и методов реакции, чтобы сделать реакцию аминокислотной конденсации более полной и полной. Кроме того, уменьшите время реакции, потому что чем дольше время реакции, тем более неконтролируемые боковые реакции, тем сложнее побочные продукты. Поэтому приведены следующие три пункта:
Можно использовать микроволновый синтез: Для некоторых аминокислот, встречающихся в процессе синтеза, которые нелегко интегрировать, можно использовать микроволновый синтез. Этот метод имеет замечательные результаты и значительно уменьшает время реакции и уменьшает образование двух ключевых побочных продуктов.
Можно использовать метод синтеза фрагмента: Когда некоторые пептиды трудно синтезировать общими методами синтеза и нелегко очистить, мы можем принять всю конденсацию нескольких аминокислот в определенном сегменте пептида в пептидную цепь в целом. Этот метод также может решить много проблем в синтезе.
Можно использовать синтез ацилгидразида: Синтез ацилгидразида пептидов является методом твердофазного синтеза N-концевого пептида Cys и C-концевого полипептида гидразида химической селективной селективной реакции между образованием амидных связей для достижения метода пептидного связывания. Основываясь на положении Cys в пептидной цепи, этот метод делит всю пептидную цепь на несколько последовательностей и синтезирует их соответственно. Наконец, пептид-мишени получается с помощью реакции конденсации жидкости. Этот метод не только значительно уменьшает время синтеза длинного пептида, но также значительно увеличивает чистоту конечного продукта.
Длинная очистка пептида
Специфика длинных пептидов неизбежно приводит к сложным компонентам грубых пептидов. Следовательно, также является проблемой очистки длинных пептидов с помощью ВЭЖХ. Амилоидная серия процесса очистки полипептида, поглощая большой опыт и успешно используется при очистке длинного пептида. Принимая новое оборудование, смешивание нескольких систем очистки, повторного разделения и других методов опыта, частота успеха длинной очистки пептидов значительно улучшилась.
Время публикации: 2025-07-03