Трипептид реагента Лимулуса представляет собой трипептидное вещество со специфической последовательностью, выделенное из лизата клеток крови мечехвоста или синтезированное искусственно. Трипептид реагента Лимулуса представляет собой хромогенный субстрат, используемый для количественного анализа (например, теста на бактериальный эндотоксин) для обнаружения и измерения компонентов грамотрицательных бактерий.—эндотоксины. Под действием ферментов, активируемых эндотоксинами, высвобождается окрашенное соединение (например, п-нитроанилин), что позволяет измерить интенсивность цвета и сопоставить ее с содержанием эндотоксина.
Принцип работы
Активация эндотоксина: в присутствии эндотоксинов амебоциты в крови мечехвоста высвобождают ферменты, тем самым запуская каскад коагуляции.
Действие фермента: активированный фермент (обычно фермент свертывания крови) затем действует на хромогенный субстрат.
Хромогенная реакция: фермент расщепляет субстрат, выделяя желтое соединение, называемое п-нитроанилин (пНА).
Количественный анализ: Интенсивность желтого цвета пропорциональна содержанию эндотоксина в образце и обычно измеряется с помощью спектрофотометра при оптической плотности 405 нм.
Методы приготовления
Трипептид-реагент Лимулуса можно получить двумя способами получения.
1. Извлечение натуральных компонентов из клеток крови Limulus и получение активного трипептида путем разделения и очистки.
2. Использование технологии твердофазного синтеза для последовательного соединения определенных аминокислотных последовательностей, точно контролируя структуру трипептида.
Из-за политики сохранения Лимулюса (такие провинции, как Чжэцзян, Фуцзянь, Гуандун и Гуанси, включили его в список «основных охраняемых водных объектов провинции» / в конце 2012 года Гонконг издал правила, запрещающие донное траление), а также из-за того, что процесс добычи сложен и трудоёмок, стоимость первого метода относительно высока. Поэтому в настоящее время широко используется твердофазный синтез. Последовательно соединяя определенные аминокислотные последовательности, можно точно контролировать структуру трипептида. Этот метод не только обеспечивает стабильность и консистенцию продукта, но и позволяет осуществлять крупномасштабное производство, удовлетворяя потребности фармацевтической промышленности в тестировании реагентов.
Время публикации: 4 ноября 2025 г.